wb 蛋白上样量近50ug 内参条带还是没有 wb添加的上样缓冲液的量是多少

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wb 蛋白上样量近50ug 内参条带还是没有 wb添加的上样缓冲液的量是多少 wb蛋白上样体积那很有可能是定量的时候不准,建议你根据内参条带的亮度调整上样量,保证内参一致的情况下再看目的条带的变化凝胶电泳是为了分离不同物理性质(如大孝形状、等电点等)的分子。加入缓冲溶液是为了调节合适的离子浓度和PH值,保持分离物质分子构象不变。缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化

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【求助】WB上样量应为多少?

>这要根据你做的蛋白表达量多少,一般是用DAB显色要50-100μg,用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg,ecl法至少20pg。我也用组织作过western,蛋白浓度的确很高。 通常我上50-100ug,足够了。如果蛋

蛋白浓度3ug/ul 做wb上样量多少

关于WB能分开的最小分子量的差别,这个要根据蛋白上样量以及胶的浓度而定吧。你可以把上样量调低一些,使这两种蛋白不出现聚团的情况。

western blot电泳时内参上样量怎么确定?

我打算将各蛋白样品浓度调成一致,再取等体积,加Loading Buffer上样,内参一般是指待测样品中含有的一个表达水平稳定的蛋白质,而不是与待测样品相区分的另外一种样品。楼主所说的内参是否与其他的什么概念混淆了?如果给更具体的信息,我可以继续回答。 Marker上样量同两个因素有关,一个是产品本身的浓度,这方面

WB上样缓冲液加加多少是怎么确定的

上样缓冲液也有多种,一般是80ul的样本加20ul的上样缓冲液,这样基本上上样50ug的体积在10ul左右。 最好是测浓度,一般不超过30-40ug,上样缓冲液一般4×或者5×,这个没太大区别。

wb时会出现蛋白偏大或偏小情况吗

会的 WB是把SDS-PAGE的胶片转移到膜上,如果蛋白在SDS-PAGE上会有偏大偏小,印染到WB上也会偏大偏小的。但WB是特异性识别目的蛋白的手段,就算印染出来的分子量有点差距也不影响结果判断的。

wb添加的上样缓冲液的量是多少

凝胶电泳是为了分离不同物理性质(如大孝形状、等电点等)的分子。加入缓冲溶液是为了调节合适的离子浓度和PH值,保持分离物质分子构象不变。缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化

western blot蛋白样品煮沸时间过长还能用吗

可以用。 western blot样品煮蛋白后结块是经常会有现象。 如果是SDS-PAGE,加了上样缓冲液后依然煮蛋白后结块,那说明蛋白样品浓度过高,已经超出了SDS可以结合的浓度。建议降低样品的浓度即可。 如果没有加含有SDS的上样缓冲液,那么就是蛋白样

wb 蛋白上样量近50ug 内参条带还是没有

那很有可能是定量的时候不准,建议你根据内参条带的亮度调整上样量,保证内参一致的情况下再看目的条带的变化

western-blot试验后得到了样本的灰度值,请问怎么...

本人不太会查资料,我的试验是要找出样本中是否含有一种蛋白,所以用了wWestern-blot是一种半定量的检测手段。 个人认为如果要通过灰度值来计算蛋白浓度,那就是和内参来做对比,因为内参的浓度是已知且单一条带的蛋白样品。通过待测样品盒内参样品灰度值做对比可以算出待测样品大概的浓度。 个人意见,仅供参考,因

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